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临床抗补体法可检测精浆免疫活性

发布日期:2018-05-14

临床发现,混合抗球蛋白反应与免疫珠试验直接法接近。将待测精液与包被免疫球蛋白的乳胶颗粒混合,然后加抗血清,显微镜下观察精子附着颗粒百分率,40%或更多运动精子黏附有这种颗粒时为阳性。10%〜40%为可疑,10%以下为阴性。该方法的优点是简单、快捷,且可定量、定位抗体。缺点是检测到的抗体较复杂,特异性不高。

美国试管婴儿服务机构好孕美宝介绍到,ELISA试验用正常精子膜抗原包被反应板,加待测标本及酶标记二抗和底物显色,阳性孔为明显黄色,阴性孔不显色。可用酶标光度计来判定。该检测方法具有客观、敏感、定量、特异和稳定等特点,可批量操作,不需活精子,非常适合临床检验。缺点影响因素多,不能确定抗体结合部位。

临床抗补体法可检测精浆免疫活性

以胶体金显色为指示剂,利用免疫斑点与薄层层析渗滤结合的方法,可在2分钟内迅速完成抗精子抗体的检测。薄层层析膜上标有精子抗原斑点,当含有抗精子抗体的液体流经精子抗原斑点时,使其与之结合形成免疫斑点。胶体金标记在葡萄球菌A蛋白上,利用SPA能与IgG的Fc段结合的原理,可使胶体金在免疫斑点处聚集显红色。美国试管婴儿服务机构好孕美宝介绍到,另设一条质量控制的带用以判断试验结果的可靠性。

由于该方法特异性好,灵敏度高,且试剂可长期保存,是一种值得推荐的检测抗精子抗体的方法。检测方法取上述检测盒,在反应孔中加待测血清,待其完全渗入,弃去过滤器,加入金标SPA渗人后再加磷酸盐缓冲液(PBS),渗入后再加,洗去背景后观察结果。在反应孔内出现红色条杠和斑点为抗精子抗体阳性,只出现红色条杠为阴性(即仅有质控条带显色),反应孔中无任何显示为检测失败。

美国试管婴儿服务机构好孕美宝介绍到,精浆免疫抑制物(SPIM)为多种物质,临床上多采用抗补体法检测精浆免疫抑制物活性。其基本原理和方法为,以兔抗羊红细胞抗体致敏的羊红细胞为指示剂,将待测精浆与豚鼠血清(含补体)混合,再加入致敏羊红细胞与不加精浆的对照管比较,观察在SPIM作用下,溶血活性是否降低。


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